DNA的08靠設計視覺合成、組裝及轉移技術_中國發展門戶網－國家發展門戶

野生型基因組清除技術

合成生物學目前尚未能完全從頭合成一個完開幕活動整的細胞結構，只能借用已有的宿主細胞。為獲得只含有人工合成基因組的生命體，需要采取一定的策略將野生型染色體清除。

基于負篩選的染全息投影色體清除策略

即使在人工染色體已經植入宿主細VR虛擬實境胞并能發揮功能的情況下，對應內源舞臺背板染色體在自然狀態下丟失的概率依舊極低，需記者會要通過篩選才有可能獲啟動儀式得這類細胞。Li等曾報道用正負篩選聯合品牌活動的策略成功去除 21 三體綜合征患者誘導多功能干細胞（iPSCs）中的一條 21 號染色體，使其核型恢復正常。他們把一個同時編碼負篩選標記和正篩選標記的雙功能融合基因敲入到 21 號染色體；通過正篩選獲得融合基因整合的細胞株，場地佈置并從中進一步篩選獲得融合基因單拷貝的細胞經典大圖株；接著在無正篩選藥物的條件下培養，產生攜帶融合基因的染色全息投影體丟失的細胞。由于負篩選基因能將無毒的負篩藥物轉化成有毒的物質，進而把宿主細胞殺死，故可以通過負篩選富集獲得一條 21 號染色體丟失的細胞株。通過正負篩選策略進行合成染色體轉移后的內源染色體FRP的清除，展場設計需要依賴于大型公仔首先將平面設計正負篩選融合基因插入指定的內源染色體人形立牌。近年來，基因編輯技術的飛展覽策劃速發展有道具製作望進一步提升該策略展場設計的效率。經典大圖

場地佈置Cre-loxP 介導的染色體清除

Cre是一種重組酶，能識別 DNA 上的 loxP位點，并能根據兩個loxP 位點的排列方向將其之間模型的 DNA 片段進行刪除、倒置等。此方法也可用于內源染色體的清除。通過與鼠胚大型公仔胎干細胞（ESCs）融合，人成體細胞細胞核可以被重編程，獲得多能性，但需要在重編程后將 ESC 來源的相關染色體舞臺背板清除。為達到此目的，Matsumura 等設計了一個基展覽策劃于 Cre-loxP重組系統的策略——CEC（chr活動佈置omosome elimination cassette）模型。CEC的中部攜帶一個熒啟動儀式光報告基因和一個抗藥篩選標記，其兩端分互動裝置別加入一個 loxP 位點，二者相向排列。Cre 介導的姐妹染色體重組，可以產生雙著絲粒染色體和包裝設計無著絲粒染色體，此類異常染色體可在細胞分裂中被清除。然而，與基于正負篩選融合基因的策略類似，都需要事先對目標染色品牌活動體進行相關基因的敲展覽策劃入操作。